爱帕琳肽12(AP12)酶联免疫吸附测定试剂盒

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ELISA简介
ELISA原理

随着酶标记术的发展，将抗体与酶连接来提高其特异性和灵敏度变得十分流行。1971年瑞典学者Engvall和Perlmann，荷兰学者Van Weeman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，称为酶连免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA）。ELISA已被证明在蛋白与核酸检测中十分有用的一种技术。

ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的灵敏度。

ELISA的类型

ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三分必要的试剂：⑴固相的抗原或抗体，即“免疫吸附剂"(immunosorbent)；⑵酶标记的抗原或抗体，称为“酶连物"、“结合物"(conjugate)；⑶酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。

绝大多数ELISA使用以下几种策略：

1. 间接ELISA（Indirect ELISA）: 用于筛检抗体（抗特定抗原成分的特异性抗体）。此法是测定抗体常用的方法。

2. 夹心ELISA（Sandwich ELISA）: 用于检测目的抗原的量。其优点是避免了对特异性抗体的直接标记，但增加了操作步骤和测定时间。

3. 竞争ELISA（Competitive ELISA）: 用于确定抗原特异性或待检标本中含交叉反应成分时为了提高实验的特异性而使用的一种方法。根据标记抗原与同种未标记待测抗原与抗体间发生竞争性结合的原理，主要用于测定小分子抗原。

4. ABS-ELISA法，ABS为亲和素(avidin）生物素(biotin)系统(system)的略语。亲和素是一种糖蛋白，分子量60000，每个分子由695个能和生物素结合的亚基组成。