褪黑素(MT)酶联免疫吸附测定试剂盒

ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗体，这些抗体就会与HEV 的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与第一次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应，并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗体elisa试剂盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。

发展前景
临床测定技术的发展主要在于方法学的发展，而方法学的发展依托于试剂生产技术不断进步更新和型标记物的应用。分子生物学正在并最终肯定会让对整个生命科学有一个全面而*的认识，其对免疫测定技术发展的影响也是直接而又有效的，对以前一些难以检测的生物活性物质的测定，并且大大提高了检测的灵敏度和特异性。
主要设备
试剂
（1）　包被缓冲液（PH9.60.05M碳酸盐缓冲液）:
Na2CO3 1.59克
NaHCO3　 2.93克
加蒸馏水至1000ml
（2）　洗涤缓冲液（PH7.4PBS）：0.15M
KH2PO4 　0.2克
Na2HPO4·12H2O　2.9克
NaCl　8.0克
KCl　0.2克
Tween-20　0.05%　0.5ml
加蒸馏水至1000ml
（3）　稀释液：
牛血清白蛋白（BSA） 0.1克
加洗涤缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10%使用。
（4）　终止液（3M　H2SO4）：
蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸（98%）21.7ml。
（5）　底物缓冲液（PH5.0磷酸枣柠檬酸）:
0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml
0.1M柠檬酸（19.2克/L）　 24.3ml
加蒸馏水50ml。
（6）　TMB（四甲基联苯胺）使用液:
TMB（10mg/5ml无水乙醇）0.5ml
底物缓冲液（PH5.5）　 10ml
0.75%H2O2　 　32μl
（7）　ABTS使用液:
ABTS　0.5mg
底物缓冲液（PH5.5）　 1ml
3%H2O2　 　2μl
（8）　抗原、抗体和酶标记抗体。
（9）　正常人血清和阳性对照血清。
器材
（1）　聚苯乙烯塑料板（简称酶标板）40孔或96孔，ELISA检测仪，50μl及100μl加样器，塑料滴头，小毛巾，洗涤瓶。
（2）　小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。
（3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。