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大鼠瘦素(LEP)酶联免疫吸附测定试剂盒 |
酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA或ELASA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验,本词条从定义、基本原理、分类方法、操作要点等方面对其进行了详细介绍。
中文名
酶联免疫吸附剂测定
外文名
enzyme linked immunosorbent assay
简写
ELISA或ELASA
类型
概念
大鼠瘦素(LEP)酶联免疫吸附测定试剂盒
酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法"(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
大鼠(MDA)elisa试剂盒操作注意事项 1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。 8)加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。 9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 |
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